Guanajuato (Purépecha: Kuanajuato) is een stad in Mexico en hoofdstad van de gelijknamige staat. De stad ligt circa 370 km ten noordwesten van Mexico-Stad, op een hoogte van 1,996 m boven zeeniveau. De stad heeft 70.798 inwoners (census 2005).
Guanajuato werd gesticht in 1554 aan de Rio Guanajuato vanwege de zilvermijnen in de omgeving. Het kreeg in 1741 de status van stad.
De stad speelde een hoofdrol in de Mexicaanse Onafhankelijkheidsoorlog, aangezien dit in 1810 de eerste grote stad was die werd ingenomen door de onafhankelijkheidsbeweging van Miguel Hidalgo.
